PCR, яки полимераз чылбыр реакциясе - ДНК эзлеклелеген көчәйтү өчен кулланылган техника.Аны беренче тапкыр 1980-нче елларда Кэри Маллис эшләде, ул эше өчен 1993-нче елда Химия буенча Нобель премиясенә лаек булды.PCR молекуляр биологияне революцияләде, тикшерүчеләргә кечкенә үрнәкләрдән ДНКны көчәйтергә һәм җентекләп өйрәнергә мөмкинлек бирде.
PCR - җылылык велосипедында булган өч этаплы процесс, реакция катнашмасы температурасын тиз үзгәртә ала торган машина.Өч адым - денатурация, аннальинг һәм киңәйтү.
Беренче адымда, денатурация, ике катлы ДНК югары температурада (гадәттә 95 ° C тирәсе) җылытыла, ике чыбыкны бергә тоткан водород бәйләнешен өзәр өчен.Бу ике юллы ДНК молекулаларына китерә.
Икенче адымда, аннальинг, температура 55 ° C тирәсенә кадәр төшерелә, праймериз бер полосалы ДНКда тулыландырылган эзлеклелектә анналь булырга мөмкинлек бирә.Праймерлар - максатчан ДНКда кызыксыну эзлеклелегенә туры китерелгән кыска ДНК кисәкләре.
Өченче адымда, киңәйтү, температура 72 ° C тирәсенә күтәрелә, Так полимеразына (ДНК полимеразының бер төре) праймерлардан яңа ДНК полосасын синтезларга мөмкинлек бирә.Так полимерасы кайнар чишмәләрдә яшәгән һәм PCR кулланылган югары температураларга каршы тора алган бактериядән алынган.
PCRның бер циклыннан соң, нәтиҗә ДНК эзлеклелегенең ике күчермәсе.Берничә цикл өчен өч адымны кабатлап (гадәттә 30-40), максатчан ДНК эзлеклелегенең күчермәләре саны тиз арада артырга мөмкин.Димәк, ДНКның кечкенә күләме дә миллионнарча, хәтта миллиардлаган күчермәләр чыгару өчен көчәйтелә ала.
PCR тикшеренүләр һәм диагностика өлкәсендә бик күп кушымталарга ия.Бу генетикада геннар һәм мутацияләр функциясен өйрәнү өчен, суд-медицина экспертизасында, ДНК дәлилләрен анализлау, патогеннар булуын ачыклау өчен йогышлы авырулар диагнозы һәм балага узучы генетик бозуларны тикшерү өчен пренаталь диагностикада кулланыла.
PCR шулай ук санлы PCR (qPCR) кебек берничә вариациядә куллану өчен җайлаштырылган, бу ДНК күләмен үлчәргә һәм кире транскрипция PCR (RT-PCR), бу РНК эзлеклелеген көчәйтү өчен кулланыла ала.
Күп кушымталарына карамастан, PCR чикләүләре бар.Бу максатчан эзлеклелекне һәм тиешле праймериз дизайнын белүне таләп итә, һәм реакция шартлары дөрес оптимизацияләнмәсә, ул хата булырга мөмкин.Ләкин, эксперименталь дизайн һәм башкару белән, PCR молекуляр биологиядә иң көчле коралларның берсе булып кала.
Пост вакыты: 22-2023 февраль